Electrophorèse sur gel --- Introduction ---

Ce module regroupe pour l'instant 15 exercices sur l'électrophorèse sur gel. L'électrophorèse sur gel est une des techniques analytiques les plus utilisées dans les laboratoires de biologie car à partir d'un même principe, se sont développées de multiples applications.
Les exercices abordent les thèmes suivants : la détermination du sens de migration de divers types de molécules, les paramètres influençant la vitesse de migration, la comparaison des techniques utilisées pour les protéines et pour les fragments d'acides nucléiques, les gels d'électrophorèse comme tamis moléculaires et des applications comme le Western blot, l'électrofocalisation et les gels 2D.

D. Acides aminés 1

h :
a a a -


E. Acides aminés 2

h :
a a a -


G. Acrylamide ou agarose


F. ADN / protéines

?


C. Anions/Cations


N. Electrophorèse bidimensionnelle

Pour analyser des mélanges complexes de protéines, il peut être nécessaire de les séparer selon deux critères différents : leur point isoélectrique (pI) , par une éléctrofocalisation, et leur masse moléculaire, par une électrophorèse à travers un tamis moléculaire en présence de détergent (SDS). Le gel issu de l'électrofocalisation est placé au sommet d'un gel d'électrophorèse classique : la migration dans ce tamis moléculaire se fait à 90° de la direction d'électrofocalisation.
électrophorèse bidimensionnelle
  1. ?

A. L'électrophorèse sur gel : définition


J. Masse moléculaire d'un polypeptide / protéines étalons

h.
a a a -


M. Migration dans un gradient de pH

h :
a a a -


I. Estimation de la masse moléculaire

h :
a a a -


H. Migration électrophorétique

h :
a a a -


L. Concentration en acrylamide

Des protéines dénaturées sont soumises à une électrophorèse sur gel de polyacryamide (SDS-PAGE) et révélées par le bleu de Coomassie. La concentration en acrylamide utilisée est choisie en fonction de la masse moléculaire des protéines étudiées.
6 gels d'électrophorèse
  1. ?
  2. ?

B. Pourquoi un gel...pourquoi du SDS

h.
a a a -


K. Réactifs pour électrophorèse


O. Western blot


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